Jane Doe (Jane)
A personagem é a principal da série, onde suas tatuagens levam a grandes descobertas. A mesma é interpretada pela atriz Jaimie Alexander. E trabalha junto ao FBI, para evitar diversos crimes. Durante a história, ela acaba de apaixonando pelo agente Kurt Weller e acaba se casando com o mesmo.
Kurt Weller
O agente do FBI é também um dos principais personagens da série, que consequentemente vive grandes emoções com as descobertas das tatuagens. O mesmo é interpretado pelo ator Sullivan Stapleton e sua grande atuação é elogiada pelos fãs da série.
Agente Patterson
A personagem é a responsável pela parte de tecnologia do FBI, e por isso é uma das principais responsáveis para conseguir descobrir os significados das tatuagens de Jane. A atriz escolhida para viver Patterson foi Ashley Johnson, que também vive momentos de grande emoção da série.